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脫氫酶(DHA)測(cè)試盒

簡(jiǎn)要描述:

脫氫酶(DHA)測(cè)試盒是一類(lèi)催化物質(zhì)氧化還原反應(yīng)的酶,催化底物通過(guò)細(xì)胞色素系統(tǒng)被氧化,釋放的能量供機(jī)體使用,是生物體取得能量的一種方式。

更新時(shí)間:2024-09-02;廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商;覽量:2798

商品詳情:
脫氫酶(DHA)測(cè)試盒測(cè)定意義

脫氫酶(dehydrogenase, DHA) 是一類(lèi)催化物質(zhì)氧化還原反應(yīng)的酶,催化底物通過(guò)細(xì)胞色素系統(tǒng)被氧化,釋放的能量供機(jī)體使用,是生物體取得能量的一種方式。

測(cè)定原理

在細(xì)胞呼吸過(guò)程中,氫受體2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC)在脫氫酶作用下接受氫以后,被還原為三苯基甲鐟(Triphenyl Formazone, TF),TF呈現(xiàn)紅色,于485nm測(cè)定其吸光值,即得脫氫酶活性。

自備實(shí)驗(yàn)儀器及用品

天平、恒溫培養(yǎng)箱或水浴鍋、低溫離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96孔板、冰、蒸餾水、甲醇(不允許快遞,請(qǐng)用戶(hù)自備)。
試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1瓶(棕色),4℃避光保存。臨用前加入667μL無(wú)水乙醇,蓋緊后充分混勻,再加入9.333 mL蒸餾水混勻,避光保存。

試劑四:粉劑×1管,4℃避光保存。臨用前加1 mL蒸餾水,充分溶解。

標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1瓶,臨用前加10 mL蒸餾水,充分溶解。1μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液,4℃避光保存。
商品屬性:

貨號(hào)

規(guī)格

檢測(cè)方法

YSH3469

100管/96樣

微量法

YSH3469-1

50管/48樣

可見(jiàn)分光光度法


測(cè)定操作:

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到570 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 空白管:取EP管,加入10μL蒸餾水,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,于570nm測(cè)定吸光值,記為A空白管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測(cè)完。

3. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,加入10μL標(biāo)準(zhǔn)品,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,于570nm測(cè)定吸光值,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測(cè)完。

4. 測(cè)定管:取EP管,加入10μL上清液,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,于570nm測(cè)定吸光值,記為A測(cè)定管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測(cè)完。

注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需要測(cè)定一次。

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