PCR核酸檢測(cè)試劑盒是怎么利用PCR技術(shù)完成檢測(cè)的？
PCR核酸檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理是以病毒*的基因序列為檢測(cè)靶標(biāo)，通過PCR擴(kuò)增，使我們的選擇這段靶標(biāo)DNA序列指數(shù)級(jí)增加，每一個(gè)擴(kuò)增出來的DNA序列，都可與我們預(yù)先加入的一段熒光標(biāo)記探針結(jié)合，產(chǎn)生熒光信號(hào)，擴(kuò)增出來的靶基因越多，累計(jì)的熒光信號(hào)就越強(qiáng)。所以，核酸檢測(cè)，其實(shí)就是通過檢測(cè)熒光信號(hào)的累積來確定樣本中是否有問題。
PCR核酸檢測(cè)試劑盒，PCR就是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PolymeraseChainReaction，PCR)，可使特定DNA的片段進(jìn)行體外快速擴(kuò)增。什么意思呢？就是用PCR技術(shù)，可以把一段DNA序列成千上萬(wàn)倍地復(fù)制粘貼。就是“變性、退火、延伸”這三個(gè)步驟的不斷循環(huán)。
具體來說，這三個(gè)步驟的實(shí)現(xiàn)方法是：
1、變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備；
2、退火：退火也叫復(fù)性，模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，在這個(gè)溫度下，模板DNA單鏈能夠與引物的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合；所謂引物，是一段已經(jīng)確定好DNA的片段，通過引物找到模板DNA的相應(yīng)位置，也就是確定了復(fù)制的起點(diǎn)；
3、延伸：DNA模板-引物結(jié)合物在72℃、DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)的作用下，以dNTP(脫氧核糖核苷三磷酸，可構(gòu)成DNA)為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則和半保留復(fù)制原理，就能合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的復(fù)制鏈。
PCR核酸檢測(cè)試劑盒通過提取樣本中的RNA，通過PCR技術(shù)，先逆轉(zhuǎn)錄形成DNA，再對(duì)DNA進(jìn)行擴(kuò)增，最后以熒光的方式讀取信號(hào)。如果PCR檢測(cè)到足夠強(qiáng)的信號(hào)，那么就可以說樣本中存在問題，反之則說明沒有問題。
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